Drożdże 1. Dlaczego badamy drożdże?: Są to najprostsze organizmy eukariotyczne Zrozumienie biologii złożonych układów co może odbywać się poprzez porównywanie ich z prostszymi organizmami Drożdże pączkujące (S.cerevisiae) i rozszczepkowe (Schiz...
Drożdżowe systemy ekspresyjne Każdy system ekspresyjny składa się z wektora ekspresyjnego oraz komórek gospodarza Drożdżowe systemy ekspresyjne to wektory wahadłowe, cechy: Mają część bakteryjną i drożdżową Część bakteryjna: Ori - msce startu replikacji Marker selekcyjny dla bakterii np oporno...
Drożdżowe systemy ekspresyjne 1. Drożdże są dogodnymi systemami, ponieważ: Szybko rosną Osiągają znacznie większą biomasę niż org prokariotyczne (nawet 100 g sm/l hodowli) Są zdolne do przeprowadzania modyfikacji posttranslacyjnych niezbędnych do prawidłowego funkcjonowania i białek pochodzących...
Genetyka Aspergillus 1. Wiadomości ogólne Obecnie wykorzystuje się 2 gatunki Aspergillus: A.nidulans A.niger W badaniach: Rekombinacji Regulacji genów Funkcjonowania i regulacji szlaków metabolicznych A.niger jest wykorzystywany w przemyśle: 1) Produkcja kw org: Cytrynowego Glukonowego ...
Genetyka klasyczna i analiza mutantów: Celem prowadzenia badań genetycznych jest zidentyfikowanie i poznanie podłoża genetycznego procesów, a także przewidywanie jak będzie zachowywał się mutant,...
Jak tworzymy klejstotecjum?: Posiewamy dwa szczepy obok siebie Na łączeniu wycinamy kwadracik i przenosimy go na nowy agar Na złączeniu mamy klejtotecja Jak je wyizolować? Pobieramy specjalną igłą i manipulujemy tak nią, żeby otrzymać sam...
Kariotypowanie elektroforetyczne 1. Kariotypowanie Oznaczanie liczby chromosomów i ich rozmiarów Oznaczenia takie potwierdza się badaniami cytologicznymi. Grzyby niedoskonałe: Głównie w stosunku do nich stosowane jest kariotypowanie Nie mają zdolności reprodukcji seksualnej, więc wszystkie bad...
Mapowanie mejotyczne: Określenie ilości loci Ilości chromosomów (A.nidulans: 8 chromosomów). 7. Badanie diploidalności kolonii: 1) Objętość spor 2) Wrażliwość na benomyl 3) Komplementacja recesywnych spor markerem, jakim jest kolor 4) Test określający ploidalność 8. Selekcja szczepów diploid...
Metylacja u N.crassa: Metylacja u N.crassa jest blisko powiązana z RIP Metylacja powoduje wyciszanie genów u tego grzyba W przeciwieństwie do ssaków i roślin, metylacja u N.crassa nie jest ukierunkowana na miejsca symetryczne (np. miejsca CpG) Jeśli w czasie procesu płciowego zajdzie RIP to jest...
Mitoza a mejoza: W mitozie chromosomy homologiczne nie ustawiają się obok siebie i nie ma między nimi „połączenia” ale zdarza się, że chromosomy wymieniają się między sobą fragmenty, czyli dochodzi...
