MARKERY: Marker genetyczny: to odmiana allelu, która może być wykorzystana jako `znacznik' określonej struktury, bądź procesu biologicznego w trakcie analiz. Są to łatwo rozpoznawalne znaczniki sprzężonych z nimi cech fenotypowych (często o znaczeniu użytkowym). Stanowią podstawę selekcji w
WESTERN BLOT: Pierwszym etapem w metodzie WB jest rozdział białek za pomocą elektroforezy na żelu poliakrylamidowym. Najczęściej wykorzystuje się elektroforezę denaturującą z wykorzystaniem siarczanu dodecylu sodu (SDS-PAGE). Obecność SDS pow...
BEZPOŚREDNI TEST ELISA: Test Elisa jest jednym z najpowszechniej stosowanych testów diagnostycznych pozwalających na wykrywanie białka obecnego w materiale biologicznym przy udziale specyficznych przeciwciał skonfigurowanych z enzymem. Działanie testu tego polega na tym, że
DNA Preparat DNA może być przechowywany - w temp. Pokojowej przez krótki czas - w temp. 4°C po dodaniu chlorofilu (5μl chloroformu/ 1ml DNA) przez długi okres czasu - w stanie zamrożenia przez nie ograniczony czas Przygotowanie materiału roślinnego do analizy DNA: 1.Sterylizować po 5 ziarniakó...
ETAPY PCR: Wstępna denaturacja: Całkowita denaturacja DNA na początku reakcji PCR jest bardzo istotna. Niepełna denaturacja sprawia, że nie całe DNA może być wykorzystane jako matryca w I cyklu, a to z kolei powoduje zmniejszenie ilości amplifikowanych produktów. Etap wstępnej denaturacji powinien t...
Fluorymetria Zasada metody Instrumentalna metoda analityczna wykorzystująca zjawisko emisji promieniowania fluorescencyjnego przez cząsteczki oznaczanego składnika. Intensywność emitowanego promieniowania jest proporcjonalna do stęż...
RNA Główne rodzaje RNA -mRNA -1-5% komórkowego RNA -tRNA -około 20% -rRNA - 75% Metody izolacji RNA 1 Izolacja specyficznego RNA poprzez frakcjonowanie całego RNA komórki 2 bezpośrednia izolacja specyficznego RNA, ograniczona wyłącznie ...
SKŁADNIKI MIESZANINY REAKCYJNEJ: matrycowe DNA; starter; MgCl2; dNTP, polimeraza; bufor do PCR. MATRYCOWE DNA: nie może być zdegradowane ani zanieczyszczone. Inhibitorami PCR są m.in. fend, EDTA, proteinoza K. Najczęściej w 20 μl mieszaniny reakcyjnej stosuje się 10-100 ng matrycy. Zbyt duża ilość D...
WSTĘP DO DIAGNOSTYKI MOLEKULARNEJ Materiał zwierzęcy i ludzki: -krew odwodowa -komórki nabłonka -fibroblasty -komórki pyłu owodniowego (10ml) -komórki kosmówki (10mg) -cebulki włosów (R...
Metody dezintegracji komórek fizyczne -zamrażanie i rozmrażanie -wywoływanie szoku osmotycznego 2. chemiczne -stosowanie detergentów 3. mechaniczne -rozcieranie z perełkami szklanymi, pisakiem, tlenkami glinu, rozcieranie tkanki wysuszone...
