Metody dezintegracji komórek
fizyczne
-zamrażanie i rozmrażanie
-wywoływanie szoku osmotycznego
2. chemiczne
-stosowanie detergentów
3. mechaniczne
-rozcieranie z perełkami szklanymi, pisakiem, tlenkami glinu, rozcieranie tkanki wysuszonej lub zamrożonej w ciekłym azocie
Niszczenie membran komórkowych
-fosfolipidowe membrany komórkowe oraz błona jądrowa niszczone są przy pomocy detergentów (SDS,CTAB)
-niszczenie membran przeprowadzane jest w buforze estakcyjnym, który utrzymuje właściwe pH i stabilizuje DNA
Bufor ekstrakcyjny zawiera ponadto EDTA, który hamuje przy Mg2+, będące kofaktorami nukleaz
-aktywność nukleaz hamowana jest także przez ß-merkaptoetanol
... zobacz całą notatkę
Komentarze użytkowników (0)