Metody oceny żywotności komórek - wykład

Omów metody oceny żywotności komórek  Odróżnienie komórek martwych od żywych - komórki żywe mają ciągłą błonę komórkową i posiadają zdolnośd wydalania dodatnio naładowanych cząstek barwników poza komórkę - błękit trypanu, jodek propidyny, jodek etydyny .  Barwienie cytoplazmy kom. roślinnych:  czterochlorek trifenylotetrazolowy - TTC  tioctan fluoresceiny - FDA - fluorescencja żywych komórek;  błękit Evansa - barwi cytoplazmę martwych komórek.  Badanie aktywności dehydrogenazy mleczanowej (LDH) uwalnianej do podłoża przez komórki martwe. Barwienie fluorescencyjne: Calcein AM, Ethidium Homodimer-1 Przenikająca przez błony kalceina AM jest cięta przez esterazy wyst. w żywych komórkach do produktu wykazującego zieloną fluorescencję. Homodimer-1 etydyny (nie ma zdolności przenikania przez błonę kom.) znakuje DNA martwych komórek na czerwono. SYTO 9, Propidium Iodide SYTO wnika przez błonę żywych komórek i znakuje kwasy nukleinowe na zielono. Jodek propidyny również wiąże się z DNA i RNA, ale tylko w martwych komórkach, gdyż żywe dysponują mechanizmami eliminowania barwnika z komórki. ... zobacz całą notatkę