TESTY WYKRYWAJĄCE AMINOKWASY:
TYROZYNĘ - PRÓBA MILLONA
Wykonanie:
Do 1 cm3 roztworu tyrozyny dodać 1-2 krople odczynnika Millona i ogrzewać przez 1 minutę we wrzącej łaźni wodnej. Wytrącenie się czerwonego osadu lub czerwona barwa roztworu świadczy o obecności tyrozyny.
Interpretacja:
Reakcja ta jest charakterystyczna dla pierścienia fenolowego. Z aminokwasów jedynie
tyrozyna wolna lub związana w białkach daje z odczynnikiem Millona [Hg(NO3)2 w stężonym HNO3] czerwony osad.
TRYPTOFAN - PRÓBA ADAMKIEWICZA - HOPKINSA
Wykonanie:
Do 1 cm3 roztworu tryptofanu dodać 1 cm3 stężonego CH3COOH i lekko wymieszać.
Mieszaninę podwarstwić 2 cm3 stężonego H2SO4. Obserwować reakcję barwną na granicy dwóch cieczy.
Interpretacja:
Dodatni wynik reakcji charakteryzuje się powstaniem fiołkowego pierścienia na granicy cieczy. Tworzące się fiołkowe zabarwienie jest wynikiem reakcji tryptofanu (pierścień indolowy) z kwasem glioksalowym. Kwas glioksalowy występuje jako zanieczyszczenie stężonego kwasu octowego.
FENYLOALANINĘ - PRÓBA KSANTOPROTEINOWA
Celem zadania jest wykazanie obecności aminokwasów aromatycznych w badanym roztworze na podstawie reakcji barwnej, której produktami są nitrowe pochodne pierścieni benzenowych zawartych w aminokwasach aromatycznych.
Wykonanie. Do 1 cm3 1% roztworu białka dodać ok. 1 cm3 stęż. HNO3 i ogrzewać mieszaninę przez 30 sekund. Osad strącającego się białka barwi się na żółto.
CYSTEINĘ
Celem zadania jest wykazanie obecności cysteiny w badanym roztworze na podstawie powstającego siarkowodoru i siarczku ołowiu.
Wykonanie. Do 1 cm3 1% roztworu białka dodać 1 cm3 20% NaOH i parę kropli 2 mol/dm3 octanu ołowiu (II), podgrzać. Płyn ciemnieje. Mieszaninę oziębić i dodać do niej ostrożnie kroplami stężony HCl. Wydziela się siarkowodór.
Z metioniny w warunkach reakcji nie powstaje siarkowodór i wynik próby jest ujemny.
CYSTEINĘ LUB CYSTYNĘ
Do 1 cm3 roztworu cysteiny lub cystyny w probówce dodać 2 cm3 roztworu NaOH i ogrzewać do wrzenia przez kilka minut. Następnie wprowadzić kilka kropel roztworu Pb(CH3COO)2 i ponownie ogrzać. Z roztworu wydziela się brunatno-czarny osad siarczku ołowiu (II) PbS.
... zobacz całą notatkę
Komentarze użytkowników (0)