To tylko jedna z 8 stron tej notatki. Zaloguj się aby zobaczyć ten dokument.
Zobacz
całą notatkę
Paulina Krzemińska 2.11.2011r.
Opis doświadczenia 2: Aminokwasy - właściwości i reakcje.
W poniższych reakcjach wykorzystywałam roztwór białka jaja kurzego dostępny dla całej grupy, który został sporządzony poprzez oddzielenia białka od żółtka i dodanie do niego 100 ml dwuprocentowego roztworu NaCl.
Przeprowadzone reakcje:
Reakcja ninhydronowa:
Reakcja ta opiera się na szeregu reakcji utleniania -aminokwasów oraz redukcji ninhydryny podczas której powstaje barwnik zwany purpurą Ruhemanna o barwie fioletowoniebieskiej oraz aldehyd o liczbie atomów węgla o 1 mniejszej, niż wyjściowy aminokwas. Dodany odczynnik
Glicyna
Prolina
Białko
Badany aminokwas
H2O
Roztwór ninhydryny w etanolu + ogrzewanie / obserwacje
Zawartość probówki od razu po dodaniu odczynnika stała się fioletowa, po ogrzaniu roztwór miał granatowe zabarwienie
Zabarwienie lekko żółte, a po podgrzaniu pomarańczowe
Po dodaniu odczynnika powstały dwie warstwy, górna była mętna; po ogrzaniu górna warstwa była ciemnoniebieska, a dolna stała się mętna i miała kolor fioletowy
Po ok. minucie od dodania odczynnika probówka zabarwiła się delikatnie na fioletowo, natomiast po podgrzaniu na granatowo
Roztwór nie zmieniał się
Wnioski
W pierwszej, trzeciej i czwartej probówce wykryłam -aminokwas. Reakcja z kwasem azotowym (III) van Slyke'a:
Reakcja ta polega na przeprowadzeniu deaminacji naszych aminokwasów.
Dodany odczynnik
Glicyna
Białko
Badany aminokwas
NaNO2 + CH3COOH / obserwacje
Wydzieliły się pęcherzyki gazu Po wstrząśnięciu probówką wytrącił się kłaczkowaty osad, a na powierzchni cieczy roztwór zaczął się pienić
Wydzieliły się pęcherzyki gazu
Wnioski
Wszystkie probówki zawierają grupę aminową.
Reakcja biuretowa Piotrowskiego:
Próba ta ma na celu wykrycie wiązania peptydowego, które daje niebiesko-fioletowe kompleksy z dwudodatnim jonem miedzi. Daje pozytywny wynik, gdy w cząsteczce występują przynajmniej 2 tego typu wiązania.
Dodany odczynnik
Glicyna
Arginina
Dipeptyd
Tripeptyd
Białko
Badany aminokwas
H2O
NaOH + CuSO4 / obserwacje
Lekko niebieski
Lekko niebieski
Po dodatku NaOH: zmętnienie; po dodatku CuSO4: niebieski kolor
Po dodatku NaOH: zmętnienie; po dodatku CuSO4: niebieski kolor
(…)
… czystymi odczynnikami
Reakcja cystynowa:
Ogrzewanie aminokwasu w silnie alkalicznym środowisku powoduje wydzielenie się jonów siarczkowych z cysteiny bądź cystyny, które następnie identyfikujemy wytrącając je z Pb2+i otrzymując czarny osad.
Dodany odczynnik
Glicyna
Cysteina
Cystyna
Metionina
Badany aminokwas
Białko
H2O
NaOH + ogrzewanie + Pb(CH3COO)2 / obserwacje
Żółto-brązowa
Czarny osad
Czarny osad…
… odczynnik
Glicyna
Cysteina
Cystyna
Metionina
Badany aminokwas
Białko
H2O
Nitroprusydek sodu + stały siarczan amonu + stężony NH3 / obserwacje
Żółta barwa
Roztwór zabarwił się na kolor malinowo-różowy
Żółta barwa
Żółta barwa
Żółta barwa
Żółta barwa
Żółta barwa
Wnioski
Cysteina znajduje się tylko w drugiej probówce
Wykrywanie metioniny metodą McCarthy - Sullivana:
Metionina w ustalonym pH daje z nitroprusydkiem sodu (Na2Fe(CN)5NO) czerwony związek.
Dodany odczynnik
Metionina
Cysteina
Białko
Badany aminokwas
H2O
NaOH + Gly + Na2Fe(CN)5NO + ogrzewanie + HCl (po ochłodzeniu) / obserwacje
Czerwone zabarwienie
Białe dymy, roztwór bez zmian
Pojawiły się białe dymy i biały osad, natomiast roztwór był zielono-brązowy
Czerwone zabarwienie
Brak obserwacji
Wnioski
W probówce 1 i 4 jest metionina
Reakcja…
…, po zalkalizowaniu zaczął się pienić i roztwór stał się ciemno pomarańczowy
Podczas całej reakcji lekko żółty
Brak zmian
Wnioski
Aminokwasy aromatyczne znajdują się w probówce 2, 3 i 4.
Reakcja Pauly'ego na obecność histydyny i tyrozyny:
Reakcja, która tutaj zachodzi ma na celu wykrycie pierścienia aromatycznego poprzez sprzęganie się związku diazowego z pierścieniem histydyny bądź tyrozyny. Produktem reakcji…
... zobacz całą notatkę
Komentarze użytkowników (0)