wejściówka-metoda Bradford

Nasza ocena:

5
Pobrań: 196
Wyświetleń: 1806
Komentarze: 0
Notatek.pl

Pobierz ten dokument za darmo

Podgląd dokumentu
wejściówka-metoda Bradford - strona 1

Fragment notatki:


alfa lakto albumina; beta lakto globulina, albumina serum, kazeina  Wiązanie peptydowe :dość  krótkie, półtorakrotne; bliskość wiazania podwójnego C karbonyl=O umożliwia to powsatnie  strultur rezonansowych =wiąz peptyd C-N ma częściowy charakt wiąz podwójnego= C-N jest  krótsze niż standardowe C-N = grupa peptydowa zbud z atomów CO-NH- stosunkowo sztywna i  płąska, możliwa jest rotacja wokół wiązań C alfa-N i C alfa-C, grupy peptydowe są ułożone pod  różnym kątem.  Metoda Melanii M. Bradford wykorzystuje  fakt przesunięcia maksimum absorpcji roztworu  barwnika Coomassie Brillant Blue (CBB) G-250 z 465 nm do 595 nm po związaniu z białkiem.  Cząsteczka barwnika CBB oddziałuje poprzez grupy SO3ˉ z dodatnio naładowanymi resztami  aminokwasowymi. Z barwnikiem reagują głównie reszty argininy, w mniejszym stopniu reszty  histydyny, lizyny, tyrozyny, tryptofanu i fenyloalaniny. Błękit brylantowy Coomassie G-250 w  środowisku kwaśnym ma brunatne zabarwienie, które po reakcji z białkiem zmienia się na błękitne.  Natężenie barwy jest proporcjonalne do zawartości białka w roztworze. Białka naleŜą do  podstawowych biopolimerów wchodzących w skład komórki. Zmiany stęŜenia białek kontrolują  procesy metaboliczne komórki. Oznaczenie stężenia białka umożliwia również określenie wartości  energetycznej spożywczych produktów białkowych. Odczynnik Bradford używany jest do  określenia stężenia białka. Procedura oznaczenia stężenia białek wykorzystuje zjawisko tworzenia  się kompleksu pomiędzy barwinkiem (Brilliant Blue G) a białkami. Kompleks białko-barwnik  powoduje przesunięcie długości fali odpowiadającej maksimum absorpcji barwnika z 465 do 595  nm. Wartość absorbancji jest proporcjonalna do stężenia białka. Jako wzorzec białka stosuje się  albuminę bydlęcą. Liniowa zależność absorbancji od stężenia lewy w zakresie stężenia białka 0,1- 1,4 mg/ml.    ... zobacz całą notatkę



Komentarze użytkowników (0)

Zaloguj się, aby dodać komentarz