To tylko jedna z 18 stron tej notatki. Zaloguj się aby zobaczyć ten dokument.
Zobacz
całą notatkę
Analiza jakościowa w metodach chromatograficznych. Co to jest chromatografia? • Chromatografia jest metodą rozdzielania mieszanin, w której rozdzielane składniki ulegają podziałowi między dwie fazy, z których jedna jest fazą nieruchomą (stacjonarną), a druga fazą ruchomą (mobilną) układu chromatograficznego. Jednak zdefiniowanie chromatografii jako metody rozdzielania, nie oddaje w pełni możliwości jej zastosowań. Należy dodać, że jest to nie tylko metoda rozdzielania, ale i analizy jakościowej i ilościowej mieszanin. Analiza jakościowa w chromatografii planarnej • ocena barwy plamek po spryskaniu powierzchni odczynnikami wywołującymi • obserwacja pod lampą UV gdy adsorbent na płytce nie zawiera wskaźnika fluoryzującego, pod wpływem światła UV uwidaczniają się na niej substancje, które fluoryzują w światle UV jeżeli adsorbent na płytce zawiera wskaźnik fluoryzujący, to pod wpływem światła o dł. 254 nm fluoryzuje cała płytka, a substancje, które wygaszają fluorescencję, są widoczne w postaci ciemnych plam • identyfikacja oparta jest na porównaniu wartości R f składników próbki i wzorców chromatografowanych na tej samej płytce • Taka sama wartość Rf substancji analizowanej i wzorca uzyskana w jednych warunkach nie jest na 100% dowodem tożsamości obu substancji. Żeby prawdopodobieństwo właściwej identyfikacji zwiększyć należy wykonać chromatografowanie w różnych układach, zmieniając fazę nieruchomą i ruchomą. W każdych zmienionych warunkach wartość Rf obu porównywalnych substancji powinna być taka sama. Jeżeli tak nie jest to substancje są różne. • Do identyfikacji chromatografowanej substancji przez jej porównanie z wzorcem, można zastosować densytometr. W tym przypadku porównuje się widmo absorbcyjne tej substancji i wzorca. Analiza ilościowa w chromatografii planarnej • oznaczenia wykonywane bezpośrednio na płytce lub bibule wizualne porównanie wielkości i intensywności zabarwienia plamki substancji analizowanej z wielkością i intensywnością zabarwienia kilku plamek wzorcowych densytometria polegająca na mierzeniu intensywności zabarwienia i wielkości plamek za pomocą układu optyczno- elektronicznego, otrzymuje się wykres w postaci densytogramu. Intensywność zabarwienia i wielkość plamki substancji analizowanej, która odpowiada powierzchni piku na densytogramie, porównuje się z intensywnością i wielkością plamek, czyli z powierzchnią
(…)
…, oraz rodzaj i
przepływ gazu nośnego) analizowana substancja ma zawsze
taką samą retencję. Można zatem porównać dane retencyjne
związków badanych z danymi retencyjnymi związków
wzorcowych. Identyczność czasów retencji nie jest jednak
dowodem stuprocentowym, że obie substancje :
identyfikowana i wzorcowa są identyczne. Wiele substancji
należących do różnych klas chemicznych może mieć taka
samą…
… jest on na szeregu
homologicznym alkanów. Indeks 6
każdego alkanu definiuje się jako
log (czas retencji)
5
100 x liczba atomów C w
cząsteczce, w każdej kolumnie i 4
każdej temp., tzn. dla n-pentanu 3
wynosi 500 a dla n-oktanu 800.
Indeks retencji każdej innej 2
substancji, względem n-alkanów 1
oblicza się lub odczytuje z
wykresu zależności log(czas 0
retencji) od liczby atomów C, 600 700 800 900 1000…
…. Należy pamiętać o
zachowaniu
takich
samych
warunków
chromatografowania, jakie stosowano przy
wyznaczaniu indeksów
zamieszczonych w
odpowiednich tablicach.
System Kovátsa
6
log (czas retencji)
Oparty jest on na szeregu
homologicznym alkanów. Indeks
każdego alkanu definiuje się jako
100 x liczba atomów C w
cząsteczce, w każdej kolumnie i
każdej temp., tzn. dla n-pentanu
wynosi 500 a dla n-oktanu 800…
... zobacz całą notatkę
Komentarze użytkowników (0)