Ćwiczenie nr 10 Oznaczanie ryboflawiny w mleku. Do analizy otrzymałem dwie próbki mleka oznaczone numerem 10 i 10’. Do dwóch kolbek stożkowych o pojemności 250 cm3 wlałem po 50 cm3 mleka oznaczając je odpowiednio 10 i 10’. Następnie dodałem bez wstrząsania 50 cm3 alkoholu metylowego, po czym obie zlewki ogrzewałem na łaźni wodnej w temperaturze 60 ºC przez 15 minut. Po oziębieniu obu kolbek dodałem do każdej z nich 0,1 cm3 lodowatego kwasu octowego i 10 cm3 metanolu. Po zamknięciu kolbek korkami wstrząsnąłem je energicznie i pozostawiłem na 30 minut do opadnięcia osadu. Po tym czasie przystąpiłem do przesączania zawartości moich kolbek. Próbki przesączyłem do kolby okrągłodennej o pojemności 250 cm3, a pozostały osad przemyłem trzykrotnie 10 cm3 porcjami 75% metanolu. Zebrane przesącze zagęszczałem w temperaturze 60 ºC przy użyciu wyparki rotacyjnej. Musiałem bardzo uważać aby część roztworu w postaci piany nie przeleciała do odbieralnika wyparki z powodu zbyt bardzo obniżonego ciśnienia. Zagęszczanie zakończyłem gdy w kolbie pozostało około 15 cm3 roztworu, który przeniosłem ilościowo do kolbki miarowej o pojemności 25 cm3. Dodałem 0,5 cm3 lodowatego kwasu octowego oraz 1 cm3 4% roztworu nadmanganianu potasowego i całość wymieszałem. Po upływie 1 minuty dodałem 1 cm3 3% roztworu nadtlenku wodoru i uzupełniłem wodą do 25 cm3. Po dokładnym wymieszaniu wyznaczyłem na spektrokolorymetrze ekstynkcję przy λ=445 nm. Ekstynkcja wynosiła 0,105 i 0,085 gdzie: ZR – zawartość ryboflawiny w mleku wyrażona w miligramach na litr 376,4 – masa cząsteczkowa ryboflawiny E – ekstynkcja badanego roztworu W- współczynnik przeliczeniowy = 500 ε – molowy współczynnik ekstynkcji ryboflawiny = 12200 l – grubość warstwy absorbującej w centymetrach Zawartość ryboflawiny w badanych przeze mnie próbach wynosiła 1,619 mg/l oraz 1,311mg/l 1 l W E ZR 4 , 376 l mg ZR / 619 . 1 1 * 12200 500 * 105 , 0 * 4 , 376 Document Outline Ćwiczenie nr 10
... zobacz całą notatkę
Komentarze użytkowników (0)