To tylko jedna z 2 stron tej notatki. Zaloguj się aby zobaczyć ten dokument.
Zobacz
całą notatkę
Produkcja nukleotydów, nukleozydów i zwIĄZKÓW pochodnych
Zasady produkcji:
1) Chemiczna lub enzymatyczna hydroliza drożdżowych kw nukleinowych
2) Bezpośrednia synteza zw z użyciem mutantów regulatorowych
3) Przekształcenie otrzymanych produktów na drodze:
Chemicznej
Mikrobiologicznej (biotransformacja)
Chemiczna lub enzymatyczna hydroliza drożdżowych kw nukleinowych (produkcja nukleotydów z drożdży):
1) Namnożenie
2) Dezintegracja grzybni w celu wyizolowania kw nukleinowych
3) Hydroliza kw nukleinowych
4) Oczyszczanie odp technikami.
5) Drożdże mają duże ilości kw nukleinowych, które wytwarzane są na przełomie fazy logarytmicznej i stacjonarnej.
Biosynteza AMP i GMP:
1) Pkt wyjścia do biosyntezy: PRPP, który jest pochodną cukru 5 węglowego (rybozy), który zawiera 2 gr fosforanowe.
2) Ulega on defosforylacji- odłączeniu pierwszej gr fosforanowej przez aminotransferazę
3) Dochodzi do rozbicia struktury glikozydowej- rozerwanie pierścienia. (Odczepienie reszty bursztynianowej przez liazę adenylobursztynianową w postaci fumaranu).
4) Dołączenie glicyny, czyli włączenie azotu, dochodzi w ten sposób do budowy 1 pierścienia heterocyklicznego- potem kolejnego. Tak powstaje IMP.
5) Dalsze przekształcenia IMP związane są z wytworzeniem AMP lub GMP (GMP przez XMP).
IMP- istotny- rozgałęzienie do AMP i GMP.
Hamowanie produktem końcowym: AMP może blokować pierwsze przekształcenie (enzym amidotransferaza)
AMP hamuje przekształcanie IMP do bursztynylo-AMP
AMP również hamuje przekszt bursztynylo-AMP do AMP
XMP hamuje przekształcanie IMP do XMP
GMP hamuje także przekształcanie IMP do XMP
Hamowanie jednego powoduje nadprodukcję drugiego.
Nadprodukcja GMP: brak enzymu syntetazy adenylobursztynianowej, ale nie możemy blokować enzymu liazy adenylobursztynianowej.
B.subtilis jest wykorzystywany do produkcji AMP, ale też może być wykorzystywany do produkcji GMP. Jeśli jest zablokowana synteza AMP, musimy dodawać na niskim poziomie te nukleotydy.
Produkcja IMP:
Drobnoustrój:
Bacillus ammoniagenes- mutanty niezdolne do dalszego przekształcenia IMP oraz z zaburzeniami przepuszczalności błony cytoplazmatycznej.
Czynniki sprzyjające nadprodukcji:
Prowadzenie hodowli w warunkach sprzyjających zwiększeniu przepuszczalności osłon komórkowych
(…)
… cytoplazmatycznej. Jest koenzymem w układach wieloenzymatycznych.
Zawartość biotyny poniżej 5µg/l powoduje wzrost komórek o zmienionej strukturze błony, która przepuszcza metabolity do środowiska i zmusza do ich ciągłej syntezy. Ponieważ metabolity są wydzielane na zewnątrz komórki, nie ma hamowania produktem końcowym (hamowania przez sprzężenie zwrotne)
Najlepiej byłoby, gdyby enzym katalizujący pierwszy etap biosyntezy nie był wrażliwy na duże stężenia produktu końcowego.
Podłoże hodowlane:
Sole mineralne
Mocznik
Cysteina
Tiamina
Czynniki wzrostowe
Adenina
Glukoza
pH lekko zasadowe (bo to są drobnoustroje gnilne)
W trakcie wzrostu dodatek komponentów, których mikroorg nie mogą same wytworzyć (ale generalnie adenina jest przekształcana w guanozyne i pochodne)
Przebieg biosyntezy IMP:
Krzywa wzrostu: klasyczna…
... zobacz całą notatkę
Komentarze użytkowników (0)