To tylko jedna z 4 stron tej notatki. Zaloguj się aby zobaczyć ten dokument.
Zobacz
całą notatkę
SZCZEPIONKI NOWEJ GENERACJI:
Z ćwiczeń 3 Szczepionki:
atenuowane np. przez delecję genó odpowiedzialnych za wirulencję
zabite mikroorganizmy
białka
Zalety atenuacji (musimy mieć pewność, że atenuacja jest nieodwracalna):
Indukcja intensywniejszej odpowiedzi imm., zabite org, indukuję bardzo słabą
Stosowanie atenuowanych organizmów do przeniesienia antygenów innych patogenów
odwrotna wakcynologia
mamy sekwencję genomu- analiza in silico program wykrywa geny kodujące białka powierzchniowe
WYKORZYSTANIE BAKTERII MLEKOWYCH JAKO NOŚNIKA ANTYGENU:
-atenuowanae bakterie mlekowe
-antygen wklonowany do DNA bakterii mlekowych
-antygen powinien ulegać ekspresji promotory konstytutywne lub indukowalne
-antygen powinien być wydzielany na zewnąrz komórkipowinien mieć sekwencję syngałową
-antygen może być albo na plazmidzie (w wielu kopiach-plazmidy wielokopijne)
-antygen może być na chromosomie (+silny promotor)
rozważa się użycie bakterii LAB jako nośników antygenów
Izolacja genów kodujących determinanty patogenezy
Listeria monocytogenes:
Organizm modelowy w badaniach nad odp.imm.generowaną wewnątrzkom.
Izolacja i charakterystyka mutantów insercyjnychokreślenie funkcji i lokalizacji genów kodujących determinanty patogenezy
Determinanty patogenezy Listeria:
-listeriolizyna O (LLO, gen hly, egzotoksyna, główny czynnik wirulencji, z rodziny hemolizyn)
-fosfolipaza
Listeria wnika drogą pokarmową (odporna jest na działanie HCl i enzymów trawiennych)
Przylega do komórki (adhezyny, internaliny)
Przenika do kępek Peyera, ma internalinę, która wywołuje fagocytozę
Zdolność przenikania bakterii przez błony wakuoli jest uwarunkowana aktywnością hemolityczną wydzielenie LLO, białko Act A odpowiedzialne jest za ruch , fosfolipaza odpowiedzialna jest za hydrolizę lipidów
Hemolizyny hly
Fosfolipazy plc
MHC II MHC I
Listeria pobudza I i II układ zgodności tkankowej
Wykorzystanie w szczepionkach antygenów zewnętrznych (MHC I)(nukleoproteina wirusa grypy NP), antygeny powierzchniowe- najbardziej zmienne= szczepionki stają się nieskuteczne
Wykorzystanie białek wewnętrznych = są lepsze, bo stabilniejsze!!!
(…)
… gronkowcami skórę
D'Herelle zastosował fagi do walki z czerwonką, cholerą, dżumą, tyfusem, infekcjami skórnymi
Po odkryciu antybiotyków zostały:
1.Gruzja Tibilisi - sterylizacja pomieszczen, walka z zakażeniami
2.Polska Ośrodek Terapii Doświadczalnej- Bruno Jasiński, Wrocław-opracowanie terapii przeciwko czeronce, biegunkom, zakażeniom krwi, zapaleniu opon mózgowych, owrzodzeniom, zakażeniom pooperacyjnym i pooparzeniowym
Wzrost szczepów antybiotykoopornych-powrót do terapii fagowych.
Projekty badawcze:
walka z paciorkowcami jelitowymi opornymi na wankomycynę, które zabijają chorych na nowotwory i AIDS
walka z Salmonella,Shigella i E.coli w produktach mięsnych i drobiowych
krople do oczu przeciwko zakażeniom gronkowcowym
walka z bakteriami MRSA (odporne na antybiotyki S.aureus)
wniosek o patent bandaża…
… w buforze lizującym (bufor fosforanowy+sacharoza+lizozym)inkubowaćdodać roztworu lizującego ściany mureinowe (Tris+EDTA+SDS)inkubować w 37inkubować w 75stopniachpróbkę zworteksować i wirowaćpobrać supernatantdodać do supernatantu bufor ORANGE-DX i wymieszaćmieszaninę przenieść do minikolumnywirowaćwyrzucić przesączumieścić minikolumnę w probówce odbierającejdodać buforu płuczącego Wash-DX->wirowaćznowu…
... zobacz całą notatkę
Komentarze użytkowników (0)