To tylko jedna z 10 stron tej notatki. Zaloguj się aby zobaczyć ten dokument.
Zobacz
całą notatkę
Ćwiczenie Temat: Izolacja i identyfikacja gronkowców Staphylococcus aureus jest Gram-dodatnim ziarniakiem o średnicy ok. 1 μm. W preparatach mikroskopowych przygotowanych z hodowli płynnych i stałych, obok pojedynczych komórek, obserwuje się charakterystyczne skupiska przypominające grona. Inną typową dla S. aureus cechą jest żółte zabarwienie kolonii na podłożach stałych, przy czym wytwarzanie barwnika zależy od składu podłoża, temperatury i światła.
Hodowla laboratoryjna gronkowca nie sprawia raczej trudności. Do wzrostu wymagane są warunki tlenowe oraz temperatura 37˚C. Zwykle wykorzystuje się podłoża agarowe wzbogacone krwią, ze względu na zdolność S. aureus do hemolizy krwinek (typu β). Identyfikację gronkowca złocistego w laboratoriach mikrobiologicznych przeprowadza się rutynowo z zastosowaniem prostych testów diagnostycznych. Przykładowa procedura postępowania przedstawiona jest na rysunku 1, natomiast w tabeli 1 umieszczono inne użyteczne w badaniach cechy S. aureus. Tab. 1. Właściwości wykorzystywane w różnicowaniu gatunków rodzaju Staphylococcus. Właściwości S. aureus. Beztlenowy rozkład mannitolu
+
Rozkład sacharozy w war. tlenowych
+
Rozkład trehalozy w war. tlenowych
+
Wytwarzanie α-toksyny
+
Wytwarzanie termostabilnej nukleazy
+
Wytwarzanie acetoiny
+
Zapotrzebowanie biotyny do wzrostu
−
Zawartość rybitolu w ścianie
+
Zawartość glicerolu w ścianie
−
Aktywność kwaśnej fosfatazy +
Wrażliwość na nowobiocynę
MIC 0,6 μg/l
Rys. 1. Schemat identyfikacji S. aureus. Fot. 1. Wzrost S. aureus na podłożu agarowym z krwią
Fot. 2. Preparat mikroskopowy komórek S. aureus barwiony metodą Grama
Fot. 3. Wynik testu na obecność enzymu katalazy - rozkład H 2 O 2 Fot. 4. Wynik testu na obecność enzymu koagulazy - aglutynacja osocza
Staphylococcus aureus jako czynnik etiologiczny Gronkowiec złocisty jest jednym z najczęściej izolowanych patogenów człowieka. Zakażenia dotyczą przede wszystkim skóry i tkanek podskórnych, zwykle z udziałem procesu ropnego (czyraki, trądzik, jęczmień, liszajec zakaźny, toksyczna nekroliza naskórka, róża,
(…)
… fibrynogenem i przeciwciałami monoklonalnymi.
Dlatego jest możliwe wykrywanie równoczesne:
clumping factor
białka A, dzieki uzyciu fragmentu Fc IgG myszy
grupowo specyficznego antygenu związanego ze strukturami powierzchniowymi S.aureus
Wynik pozytywny dla S.aureus obserwuje się jako widoczną aglutynację, bez użycia szkła powiększającego.
Odczynniki:
R1 lateks do wykrywania S.aureus - lateks uczulony ludzkim…
... zobacz całą notatkę
Komentarze użytkowników (0)