Oczyszczanie białek

Planowanie procesu oczyszczania białka

Parametry, które trzeba wziac pod uwage: ilość potrzebnego białka

- pełna analiza własciwosci, ustalanie struktury 100-200 mg

- badania kinetyczne- 5-10 mg

- otrzymanie przeciwciała monoklonalnego 500 μg

- mikrosekwencjonowanie 10 μg

czystość preparatu końcowego

- otrzymywanie przeciwciała monoklonalnego 50- 50%

- otrzymywanie przeciwciała poliklonalnego > 99%

- analiza sekwencji > 95%

- badania kinetyczne brak czynników interferujacych zachowanie aktywności biologicznej

- badania kinetyczne konieczne

- analiza sekwencji, otrzymywanie przeciwciał nieistotne

koszt - szczególnie wazny przy produkcji przemysłowej

szybkość procesu oczyszczania - wazna przy niestabilnych białkach

Współczynnik oczyszczania enzymów

Proces wydzielania i oczyszczania danego enzymu czesto wymaga kilku metod i etapów

Kazdy z etapów oczyszczania zachodzi ze specyficzna wydajnoscia i selektywnoscia wydajnosc kazdego etapu jest wyrazona liczba mówiaca, jaki procent ogólnej wyjsciowej aktywnosci enzymatycznej został odzyskany na danym etapie oczyszczania, stopien oczyszczenia enzymu wyraza sie przez współczynnik oczyszczania, czyli stosunek aktywnosci w aktualnym roztworze do aktywnosci w materiale wyjsciowym.

Oba te czynniki nalezy brac pod uwage podczas procedury oczyszczania, poniewaz czesto mozna uzyskac bardzo wysoki stopien oczyszczenia, niestety przy niskiej wydajnosci, albo odwrotnie.